一浓蜈、設(shè)備和材料

1）Copure^® PPT 96 孔蛋白沉淀板
2）biocomma^® CommaMix 多功能混勻儀
3）biocomma^® 96 孔氮吹儀
4）biocomma^® 96 孔正壓提取裝置

二未然、儀器條件

儀器：FH-6000MD UPLC-MS/MS
色譜柱：Hypersil Gol.D aQ (2.1 mm×100 mm, 1.9 μm)
柱溫：30 ℃
樣品溫度：10 ℃
進樣量：2 μL
流動相：A：Buffer A B：Buffer B
洗脫方式：梯度洗脫
表 1 流動相梯度洗脫條件

電噴霧電壓：3500 V
鞘氣壓力：35 arb
輔氣壓力：2 arb
離子傳輸管：350 ℃
輔氣溫度：340 ℃
采集方式：多反應(yīng)監(jiān)測
表 2 化合物的保留時間及離子對參數(shù)

注：* 表示定量離子對

三否胸、實驗步驟

1、樣品提取
將 25 μL 血漿和 25 μL 50% 甲醇水溶液混合均勻哮昧。
2馆梦、樣品凈化
1） 向 96 孔 PPT 板中加入 250 μL 甲醇，再將上述混好的血漿加到 96 孔 PPT 板中仓貌，在多功能混勻儀上1000 r/min 渦旋 4 min 混勻桐继。
2） 使用正壓裝置，調(diào)節(jié)壓力泉互，將 PPT 板上液體壓入到96 孔收集板中蚤弃，3 分鐘后停止正壓裝置。
3）將收集板置于 96 孔氮吹儀上严钞，40 ℃氮吹濃縮至近干偿尘。
4） 向收集板中各孔中加入 500 μL 0.1% 甲酸水溶液，渦旋混勻供上機測試渠缕。

四鸽素、實驗結(jié)果

使用空白血漿樣品配制 7 個不同濃度的校準(zhǔn)標(biāo)曲點，普瑞巴林和替米沙坦的濃度分別為：5 ng/mL亦鳞、10 ng/mL馍忽、20 ng/mL、50 ng/mL燕差、100 ng/mL遭笋、200 ng/mL、500 ng/mL徒探。所得樣品采用上述前處理方法凈化并上機檢測瓦呼，基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線見表 3。另取血漿樣品添加不同濃度目標(biāo)物進行加標(biāo)回收實驗测暗，測定結(jié)果見表 4央串。
表 3 基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線

表4 血漿中普瑞巴林和替米沙坦加標(biāo)回收實驗結(jié)果（n=3）

由以上數(shù)據(jù)表明：Copure^® PPT 96 孔蛋白沉淀過濾板對血漿樣本中普瑞巴林和替米沙坦的檢測平均回收率在 60-110% 之間，RSD 小于 10%碗啄，滿足測試要求

五质和、訂貨信息